色谱柱(为什么色谱柱分为正相柱和反相柱？)

2024-05-04 14:01:34

本文目录一览：

  • 1、为什么色谱柱分为正相柱和反相柱？
  • 2、色谱柱怎么活化?

    • 为什么色谱柱分为正相柱和反相柱？

    一、固定相不同

    正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。

    非极性色谱柱：常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流纤物耐动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。

    极性色谱柱：通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

    二、组成结构不同

    非极性色谱柱：100%甲基聚硅氧烷；5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基和5%苯基甲基聚硅氧烷；7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷。

    极性色谱柱：聚乙二醇—TPA改性；聚乙二醇—20M。

    三、应用不同

    非极性色谱柱：碳氢化合物；氨基酸、基油；多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇；药物、醇、酯、硝基化合物。

    极性色谱柱：酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油；六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药。


    色谱柱怎么活化?

    色谱柱的团团活化是指对色谱柱表面进行清洁和处理，以去除残留物、提高柱效和恢复分离能力的过程。以下是一般的色谱柱活化步骤：
    准备活化溶液：根据色谱柱类型选择合适的活化溶液，常见的有酸性和碱性活化溶液。例如，对于正相色谱柱，可以使用酸性溶液如甲醇-水-醋酸混合溶液；对于反相弊枣色谱柱，可以使用碱性溶液如甲醇-水-氨水混合溶液。
    连接色谱柱：将色谱柱连接到色谱系统，并确保活化溶液可以通过柱。
    通过色谱柱：将活化溶液缓慢地通过色谱柱，可以使用泵或手动推进，以确保溶液充分覆盖柱内表面。
    静置和冲洗：让活化溶液在色谱柱内静置一段时间（通常为15-30分钟），使其与柱内表面发生反应。然后，用适量的纯溶剂（如甲醇、乙酸乙酯等）冲洗色谱柱，以去除残留的活化溶液和其他杂质。
    干燥和储存：最后，将色谱柱放置在适当的环境中进行干燥，以确租或拆保柱内完全干燥。之后，按照柱的要求（如封口塞、保护盖等），储存柱以备下次使用。
    请注意，具体的活化步骤可能会因色谱柱类型、制造商建议或实验室要求而有所不同。因此，在活化色谱柱之前，请参考相关文献、制造商说明书或咨询专业技术人员的建议。